SAMUJLENKO ANATOLIJ JAKOVLEVICH,Самуйленко Анатолий Яковлевич,ZENOV NIKOLAJ IVANOVICH,Зенов Николай Иванович,KRASUTKIN SERGEJ NIKOLAEVICH,Красуткин Сергей Николаевич,MELNIK NIKOLAJ VASILEVICH,Мельник
申请号：
RU2013116505/15
公开号：
RU0002538617C2
申请日:
2013.04.11
申请国别(地区):
RU
年份:
2015
代理人:
摘要：
FIELD: veterinary medicine.SUBSTANCE: cultivation of a culture of continuous BHK cells is carried out for 48-72 hours to the concentration of (2.5-3.0)×106 cells/ml, followed by infecting the cells with rabies virus at a dose of 0.01-0.1 MMLD50/cells. It is maintained at a temperature of 38.5-39.5°C for 60-90 minutes, followed by dilution with growth medium to the concentration of the cell subline of (0.5-0.6)×106 cells/ml and continuation of culturing the resulting suspension for 48-72 hours at a temperature of 37-38°C and pH 7.1-7.3. After which the virus-containing suspension is cooled to a temperature of 4-8°C at pH 7.8-8.0 and tris (hydroxymethyl)aminomethane and disodium salt of ethylenediaminetetraacetic acid is added, taken in the final concentrations of 0.7-0.9% and 0.006-0.01%, respectively. To inactivate the virus, β-propiolactone is applied in the bioreactor.EFFECT: use of this method enables to improve the quality of the desired product by increasing the yield of viral antigen, the accumulation of virus particles, glycoprotein which is responsible for production of virus-neutralising antibodies, and enables to improve stabilisation of the antigenic properties of the viral glycoprotein.4 cl, 1 tbl, 9 exИзобретение относится к ветеринарии, а именно к биотехнологии, и может быть использовано для получения антирабической вакцины. Для этого культивирование культуры перевиваемых клеток ВНК осуществляют в течение 48-72 часов до концентрации (2,5-3,0)×106 кл./мл с последующим инфицированием клеток вирусом бешенства в дозе 0,01-0,1 ММЛД50/кл. Выдерживают при температуре 38,5-39,5°C в течение 60-90 минут с последующим разбавлением ростовой средой до концентрации сублинии клеток (0,5-0,6)×106 кл./мл и продолжением культивирования полученной суспензии в течение 48-72 часов при температуре 37-38°C и pH 7,1-7,3. После чего вируссодержащую суспензию охлаждают до температуры 4-8°C при pH 7,8-8,0 и добавляют трис(гидроксиметил)аминометан и динатриевая соль этилендиаминт
