The present application provides a lentiviral vector used for the treatment of sanfilippo B syndrome, lentivirus, and preparation method and application thereof, wherein the lentiviral vector may be obtained by applying pTYF or modifying a pTYF lentiviral vector at the 5'-end splice donor site and it further comprises a NAGLU gene. The NAGLU gene is specifically connected into the pTYF or the modified lentiviral vector of the present invention, thereby achieving a more efficient gene delivery while ensuring safety, significantly increasing the expression level of the NAGLU gene in transgenic brain-related cells, and more efficiently accomplishing the transfer of normal genes during the gene therapy of sanfilippo B syndrome.La présente invention concerne un vecteur lentiviral utilisé pour le traitement du syndrome de Sanfilippo de type B, un lentivirus, et son procédé de préparation et une application associée, le vecteur lentiviral pouvant être obtenu par l'application de pTYF ou par la modification d'un vecteur lentiviral pTYF au niveau du site donneur d'épissage d'extrémité 5' et celui-ci comprenant en outre un gène NAGLU. Le gène NAGLU est relié spécifiquement au pTYF ou au vecteur lentiviral modifié selon la présente invention, ce qui permet d'obtenir une administration de gène plus efficace tout en garantissant une sécurité, une augmentation significative du niveau d'expression du gène NAGLU dans des cellules transgéniques liées au cerveau, et un accomplissement plus efficace du transfert de gènes normaux pendant la thérapie génique du syndrome de Sanfilippo de type B.