The fluorescence image acquiring method includes the following steps (A) to (D). (A) A fluorescent substance in a sample is excited by irradiating a sample with excitation light of a spreading light beam from a position distant from the sample to generate fluorescence, and the generated fluorescence is detected by a two-dimensional detector to obtain a fluorescence image (B) a step in which fluorescence from the portion emitting the strongest fluorescence at the time when fluorescence is to be detected by the two-dimensional detector is substantially blocked from being incident on the two-dimensional detector, (A) at least one step of irradiating a sample with excitation light to obtain a fluorescence image with the two-dimensional detector, (C) at least one step of obtaining a fluorescence image obtained in step (A) Integrating at least two fluorescence images comprising one fluorescence image into one image, and (D) displaying the integrated image in step (C).蛍光画像取得方法は以下のステップ(A)から(D)を含む。(A)試料から離れた位置から、広がる光束の励起光で試料を照射して試料中の蛍光物質を励起して蛍光を発生させ、発生した蛍光を二次元検出器で検出して蛍光画像を得るステップ、(B)前記二次元検出器により蛍光を検出しようとする時点において最も強い蛍光を発する部分からの蛍光が前記二次元検出器に入射するのを実質的に遮断した状態で、前記ステップ(A)と同様に試料に励起光を照射して前記二次元検出器により蛍光画像を得る少なくとも1つのステップ、(C)ステップ(A)で得た蛍光画像とステップ(B)で得た少なくとも1つの蛍光画像からなる少なくとも2つの蛍光画像を1つの画像に統合するステップ、及び(D)ステップ(C)で統合された画像を表示するステップ。