In particular, there is provided a DNA construct comprising an RNA polymerase III promoter sequence and a tRNApyl coding sequence capable of functioning to express functional tRNApyl to fully support stop inhibition in a eukaryotic expression system.특히, 기능성 tRNApyl을 발현시키도록 작용하여 진핵 발현 시스템에서 정지 억제를 충분히 지원할 수 있는 RNA 중합효소 III 프로모터 서열 및 tRNApyl 코딩 서열을 포함하는, DNA 구조체가 제공된다.