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重组阿达木单抗Fab片段在大肠杆菌中的制备方法
专利权人:
上海美迪西生物医药有限公司
发明人:
吕立力,范丽君,汪俊,陈春麟
申请号:
CN201410066863.9
公开号:
CN104862328A
申请日:
2014.02.26
申请国别(地区):
中国
年份:
2015
代理人:
曹芳玲`郑优丽
摘要:
本发明涉及一种重组阿达木单抗Fab片段在大肠杆菌中的制备方法,包括:将由N端分别带有信号肽的Fab片段的重链Fd与轻链的氨基酸序列反转化的基因克隆于带有双启动子的大肠杆菌表达载体内构建重组表达载体;将所得的重组表达载体转化至作为宿主细胞的大肠杆菌获得重组菌,培养所述重组菌并在培养基中加入诱导剂诱导双基因共分泌表达获得经诱导表达的菌体;通过渗透压冲击法提取经诱导表达的菌体的周质蛋白;对所得的周质蛋白进行色谱柱纯化,即可得到阿达木单抗的Fab片段。本发明可制得较高纯度的Fab片段,且能与抗原TNF-α特异性结合,其抑制效果与全抗分子相比无明显的差异,说明该Fab片段保留了原adalimumab抗体具备的抗体性质和特异性。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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