D2C7-(scdsFv)-PE38KDEL (D2C7-IT) is a recombinant Pseudomonas exotoxin A-based immunotoxin (IT), targeting both wild-type epidermal growth factor receptor (EGFRwt) and mutant EGFR variant III (EGFRvIII) proteins overexpressed in glioblastomas. A good laboratory practice (GLP) manufacturing process was developed to produce sufficient material for a Phase I/II clinical trial. D2C7-IT was expressed under the control of the T7 promoter in Escherichia coli BLR (λ DE3). D2C7-IT was produced by a 10 L batch fermentation process and was then purified from inclusion bodies using anion exchange, size exclusion, and an endotoxin removal process that achieved a yield of over 300 mg of purified protein.D2C7-(scdsFv)-PE38KDEL (D2C7-IT) est une immunotoxine à base d'exotoxine A de Pseudomonas recombinante (IT), ciblant à la fois le récepteur du facteur de croissance épidermique de type sauvage (EGFRwt) et les protéines du variant III de l'EGFR mutant (EGFRvIII) surexprimés dans les glioblastomes. Un procédé de fabrication respectant les bonnes pratiques de laboratoire (BPL) a été développé pour produire suffisamment de matériau pour un essai clinique de Phase I/II. D2C7-IT a été exprimé sous le contrôle du promoteur T7 dans Escherichia coli BLR (λ DE3). D2C7-IT a été produit par un procédé de fermentation par lots de 10 L et a été ensuite purifié de corps d'inclusion à l'aide de procédés d'échange d'anions, d'exclusion de taille, et d'élimination d'endotoxines qui a atteint un rendement supérieur à 300 mg de protéine purifiée.
