I-DmoI derivatives with enhanced cleavage activity at 37°C, said mutant comprising a sequence of a mutant of a I-DmoI endonuclease or a chimeric 5 derivative thereof including at least the first I-DmoI domain, said sequence comprising the substitution of at least : (i) one of the residues in positions 4, 20, 49, 52, 92, 94 and/or 95 of said first I-DmoI domain, and/or (ii) one of the residues in positions 101, 102, and/or 109 of the linker or the beginning of the second domain of I-DmoI, if present. 10 Polynucleotide encoding said derivatives, cell, animal or plant comprising said polynucleotide and use thereof for isolating meganucleases with new DNA target specificity.La présente invention a trait à des dérivés de I-DmoI à activité améliorée à 37 °C, ledit mutant comportant une séquence dun mutant I-DmoI endonucléase ou un dérivé chimérique de celui-ci comprenant le premier domaine I-DmoI, ladite séquence comportant la substitution dau moins: (i) un des résidus en positions 4, 20, 49, 52, 92, 94 et/ou 95 dudit premier domaine I-DmoI, et/ou (ii) un des résidus en positions 101, 102, et/ou 109 du lieur ou le début du deuxième domaine I-DmoI, le cas échéant. Linvention a également trait à un polynucléotide codant pour lesdits dérivés, une cellule, un animal ou une plante comportant ledit polynucléotide et son utilisation pour lisolement de méganucléases avec une nouvelle spécificité cible dADN.
