本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种新颖的嗜热真菌Talaromyces leycettanus来源的酸性β‑葡萄糖苷酶Bgl3B及其基因和应用。本发明提供了一种新的酸性β‑葡萄糖苷酶Bgl3B,其具有如SEQ ID NO.1或2所示氨基酸序列,且本发明还提供了编码上述酸性β‑葡萄糖苷酶Bgl3B的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.4或5所示,以及包含该基因的重组载体和重组菌株及其应用。本发明的酸性β‑葡萄糖苷酶Bgl3B最适pH为4.5,最适温度为65℃;在60℃处理1h基本不失活,具有很好的热稳定性;在pH 3‑9条件下处理1h能够保留90%以上的活性,具有很好的pH耐受性。该酶优越的稳定性使其在能源、食品和饲料方面具有很好的应用潜力。