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一种抗艾滋病病毒感染的三联miRNA及构建方法
专利权人:
衡阳师范学院
发明人:
王芳宇,何丽芳,滕涛,杨海
申请号:
CN201310114072.4
公开号:
CN103184224A
申请日:
2013.04.03
申请国别(地区):
CN
年份:
2013
代理人:
摘要:
一种抗艾滋病病毒感染的三联miRNA及构建方法,该三联miRNA的序列系根据ccr5、pol、vif基因序列分别设计并合成miRNA寡聚单链DNA,退火成双链,然后分别插入到miRNA表达载体pcDNA?6.2-GW/EmGFPmiR中,构建成miRNA表达质粒,并通过qPCR方法检测miRNA表达质粒对靶基因的干扰效果。挑选对ccr5、vif和pol基因干扰效果最好的miRNA串联插入到pcDNA6.2?-GW/EmGFP载体中,从而获得pcDNA6.2?-GW/EmGFP-ccr5-pol-vif串联干扰载体,然后将其中的miR-ccr5-pol-vif转移到慢病毒载体pLenti6.3/V5-DEST上,构建成pLenti6.3/V5-DESTmiR-ccr5-pol-vif。该重组慢病毒可同时产生三个miRNA,分别对基因ccr5、基因pol、基因vif产生干扰作用,使其不能表达相应的蛋白质,从而达到抑制艾滋病毒感染和复制的作用。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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