The present invention provides a high affinity, antigen-specific, soluble heavy chain-only antibody which: lacks hallmark camelid-related amino acid substitutions and has FR2 substitutions which are not found in antibodies which comprise heavy and light chain； shows increased net hydrophobicity within CDR1 and an increased number of charged amino acids present in CDR3； and comprises one or more amino acid substitutions within the framework &bgr；-pleated sheet leading to increased net hydrophobicity within FR1 and increased number of charged amino acids present in FR3. Also provided are VH domains having the same properties, gene segments for their production, methods for their production, transgenic animals and uses of the antibody of the VH domains in therapy.本発明は、高親和性の抗原特異的な可溶性重鎖のみの抗体であって、顕著な特徴であるラクダ科動物関連アミノ酸置換が欠如し、重鎖および軽鎖を含む抗体においては見いだされないＦＲ２置換を有し、ＣＤＲ１内で正味疎水性の増加およびＣＤＲ３内に存在する荷電アミノ酸の数の増加をし、ＦＲ１内の正味疎水性の増加およびＦＲ３内に存在する荷電アミノ酸の数の増加をもたらすフレームワークβ－プリーツシート内に１つ以上のアミノ酸置換を含む抗体を提供する。さらに、同一特性を有するＶＨドメイン、それらを作製するための遺伝子セグメント、それらを作製するための方法、トランスジェニック動物および療法におけるＶＨドメインの抗体の使用も提供する。
