LEF1增强Trop2启动子转录活性

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作   者：

漆彦斌;  刘叙翔;  杨丽霞;  黄朝峰; 

作者机构：

中山大学中山医学院; 

关键词：

启动子;  转录激活;  Trop2;  LEF1; 

期刊名称：

医学分子生物学杂志

基金项目：

b-Catenin 调节T细胞激活后凋亡的分子机制
b-Catenin 调节T细胞激活后凋亡的分子机制

i s s n：

1672-8009

年卷期：

2014 年 003 期

页   码：

155-160

摘   要：

目的:探究Wnt信号通路相关蛋白LEF1、 TCF1、野生型β-catenin和激活型β-catenin对肿瘤相关钙信号转导因子Trop2启动子转录活性的调控作用,找出调控Trop2转录活性的转录因子并分析其可能的分子机制。方法通过生物信息学方法预测Trop2启动子上潜在的转录因子,构建小鼠Trop2启动子报告质粒,在293 T细胞中,采用荧光素酶双报告系统分析LEF1、 TCF1、野生型β-catenin和激活型β-catenin对Trop2启动子的调控作用。找出Trop2启动子上的TCF/LEF结合位点,通过定点突变的方法构建Trop2启动子TCF/LEF结合位点突变体,探究Trop2启动子转录活性调控可能的分子机制。结果经预测, Trop2启动子上存在LEF1、 TCF1等众多的潜在转录因子结合位点。荧光素酶双报告实验证明,在293 T细胞中,与空载体相比, LEF1、 TCF1都不同程度地增强Trop2启动子转录活性。其中LEF1对Trop2启动子转录活性的增强作用最为明显,达108倍。突变Trop2启动子上的TCF/LEF结合位点可以明显降低LEF1对Trop2启动子的转录活性。结论在293 T细胞中, LEF1可以极大地增强Trop2启动子的转录活性。 LEF1上调Trop2启动子转录活性是通过结合到Trop2启动子上的两个TCF/LEF结合位点而发挥作用的。