Provided is a preparation method of antibacterial lipopeptide and application thereof to a veterinary medicine. By optimizing an antibacterial lipopeptide preparation process, the yield of the antibacterial lipopeptide reaches up to 6.8 g/L. The antibacterial lipopeptide obtained by the preparation method has a better effect on gram-positive bacterium, such as staphylococcus and streptococcus. In veterinary clinical test, the antibacterial lipopeptide has a good antibacterial effect on swine pathogenic bacteria, such as haemophilus parasuis, actinobacillus pleuropneumoniae, streptococcus, pasteurella multocida, diplococcus pneumoniae, and chicken pathogenic bacteria, such as salmonella, Escherichia coli, pasteurella.Linvention concerne un procédé de préparation dun lipopeptide antibactérien et son application en médecine vétérinaire. Par loptimisation dun procédé de préparation dun lipopeptide antibactérien, le rendement du lipopeptide antibactérien atteint 6,8 g/L. Le lipopeptide antibactérien obtenu par le procédé de préparation a un meilleur effet sur une bactérie à gram positif, telle que staphylococcus et streptococcus. Dans un essai clinique vétérinaire, le lipopeptide antibactérien a un bon effet antibactérien sur des bactéries pathogènes porcines, telles que haemophilus parasuis, actinobacillus pleuropneumoniae, streptococcus, pasteurella multocida, diplococcus pneumoniae, et des bactéries pathogènes du poulet, telles que salmonella, Escherichia coli, pasteurella.