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一种基于GST‑Pull Down以及质谱分析技术寻找如皋黄鸡基因互作蛋白的方法
- 专利权人:
- 扬州大学
- 发明人:
- 李碧春,左其生,王颖洁,张亚妮,汤贝贝,李东,纪艳芹,连超,王飞,路镇宇
- 申请号：
- CN201611215943.1
- 公开号：
- CN107043764A
- 申请日:
- 2016.12.26
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 许必元
- 摘要：
- 本发明公开了一种基于GST‑Pull Down以及质谱分析技术寻找如皋黄鸡基因互作蛋白的方法：（1）目的基因克隆以及原核表达载体构建；（2）Pet‑49(b)‑GST‑目的基因的原核融合表达载体构建；（3）Pet‑49(b)‑GST‑目的基因进行原核表达；（4）对蛋白进行大量表达和破菌检测；（5）明确蛋白的表达位置后对表达的蛋白进行纯化和浓缩并进行GST‑Pull Down试验；（6）GST‑Pull Down后的蛋白进行蛋白质还原烷基化和胶内酶解并通过LC‑MS/MS鉴定获取目的基因的互作蛋白的序列。本发明能够较快的获得相关基因的互作蛋白；方法简单易行，可重复性强，在普通实验室即可进行。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
