本发明公开了一类重组蜘蛛丝蛋白系列,及其编码基因、表达、纯化方法,以及所述重组蛛丝蛋白系列在缝合线、生物修复膜、止血材料等生物材料方面的应用。本发明的重组蜘蛛丝蛋白系列,其由N末端非重复区域(N‑NRT)、核心重复区域(REP)、C末端非重复区域(C‑NRT)组成,其中核心重复区域由1‑30个RepA和/或1‑15个RepB组成,单个RepA氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,单个RepB氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明设计的一系列新型的原核系统可溶表达的蛛丝蛋白,具有较高的发酵产量和蛋白纯度,以该蛛丝蛋白系列经过简单的静纺或湿纺工艺制备的蛛丝膜、蛛丝纤维分别具有2.5‑6MPa、40‑280MPa的力学强度,且显示出良好的细胞相容性和止血性能,具备医疗领域产业化应用的前景。