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柞蚕溶菌酶的基因序列及其表达产物的制备方法
- 专利权人:
- 辽宁省农业科学院大连生物技术研究所
- 发明人:
- 范琦,张波,王林美,李树英,叶博
- 申请号:
- CN200510130926.3
- 公开号:
- CN100451119C
- 申请日:
- 2005.12.08
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 赵淑梅
- 摘要:
- 柞蚕溶菌酶基因是用大肠杆菌诱导柞蚕蛹,取柞蚕蛹脂肪体,提取总RNA,反转录成cDNA。根据已知溶菌酶基因的序列,设计简并引物,用RLM-RACE方法分别获得柞蚕溶菌酶基因5’端和3’端非编码区基因片段,并进行序列分析。根据测序结果,设计引物,通过PCR扩增得柞蚕溶菌酶基因编码区片段,并推测出编码的氨基酸序列。柞蚕溶菌酶基因编码区核酸序列为420bp,编码140个氨基酸,其中前20个氨基酸为信号肽序列,成熟肽部分为120个氨基酸;预测分子量为13,986,等电点为pI 8.46。120个氨基酸的基因片断经克隆、转化、筛选、培养、分离和层析纯化得到其表达产物。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/