本发明属于猪分子遗传学领域,具体涉及一种猪肌肉特异表达基因ITGB1BP2启动子的克隆鉴定与应用。本发明的步骤包括:提取大白猪不同组织总RNA,进行荧光定量PCR,确定其在肌肉组织中特异表达。以大白猪肌肉组织总DNA为模板,设计引物,PCR扩增获得猪ITGB1BP2基因5’端侧翼1442bp的序列,构建15个长度不同的ITGB1BP2启动子缺失片段的荧光素酶报告基因质粒,转染C2C12细胞,检测每个缺失片段的启动子活性,鉴定猪ITGB1BP2基因启动子。本发明克隆的猪ITGB1BP2基因启动子的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示,为猪的遗传改良和转基因提供了重要的元件和手段,可强化转基因表达的肌肉组织特异性和稳定性。