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一种利用毕赤酵母表达DNA聚合酶的方法
- 专利权人:
- 湖北大学;北京伟嘉人生物技术有限公司
- 发明人:
- 马立新,余晓岚,卞璐,赵慧,廖峰,赵宝凯,刘美
- 申请号:
- CN201010229160.5
- 公开号:
- CN101886087B
- 申请日:
- 2010.07.13
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 丁齐旭
- 摘要:
- 本发明提出了一种利用毕赤酵母表达来源于Thermococcus kodakarensis菌种DNA聚合酶的方法。表达步骤为:1)将前述DNA聚合酶基因克隆至巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体中,获得毕赤酵母重组表达质粒;2)将此重组表达质粒电击转化至毕赤酵母宿主菌GS115,经MD平板和PCR鉴定筛选阳性克隆;3)挑取上述阳性克隆利用0.5%甲醇诱导表达。用本发明表达源于Thermococcus kodakarensis菌种DNA聚合酶基因,通过验证,与大肠杆菌表达系统相比,该方法能够明显提高DNA聚合酶的热稳定性等性能,且能够降低生产成本,缩短工艺流程,简化纯化步骤。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/