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蔬菜中肠出血性大肠埃希氏菌的PCR检测方法
- 专利权人:
- 吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心
- 发明人:
- 罗雁非,聂丹丹,丁旭,王准,肖建光,曲辉,吴连鹏,孙玉,彭勃
- 申请号：
- CN201711384960.2
- 公开号：
- CN108179204A
- 申请日:
- 2017.12.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 张铁生
- 摘要：
- 本发明公开了一种蔬菜中肠出血性大肠埃希氏菌PCR检测方法，尤其涉及一种优化的微滴数字PCR检测反应体系。所述的微滴数字PCR检测方法包括以下步骤：a.制备样品和增菌培养；b.提取细菌模板DNA；c.以提取的DNA为模板，加入上述的引物和带荧光染料的探针以及酶反应液进行实时荧光PCR反应，所述的反应结束后，检测所有微滴的荧光信号值并设定阈值，根据荧光信号的阈值确定微滴是否包裹模板DNA，高于阈值的微滴包裹模板DNA，为阳性微滴，低于阈值的微滴不包裹模板DNA为阴性微滴，本发明提供的检测方法工作流程简单，又兼具实时荧光定量PCR方法的优点，可实现核酸绝对定量分析，并且又具有高通量样品处理能力，实用性强。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
