本发明提供一种新的重组中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow curlleaf China virus,TYCLCNV)香料烟分离物外壳蛋白基因AV1,构建该基因原核表达载体pET-28a-AV1;用重组TYCLCNV香料烟分离物外壳蛋白基因原核表达载体pET-28a-AV1转化大肠杆菌,用IPTG诱导表达重组TYCLCNV香料烟分离物外壳蛋白,回收并纯化所表达的重组蛋白;利用该重组外壳蛋白制备的抗血清建立酶联免疫吸附试验鉴别诊断方法,可以快速、准确的检测出香料烟中的中国番茄黄化曲叶病毒,填补了不能用ELISA快速、准确地检测鉴定香料烟曲叶病病原的空白。本发明所提供的用于香料烟曲叶病病原检测的原核表达的外壳蛋白及利用其制备的抗血清,可以得到大量的表达,适合大规模生产。