本发明涉及QPCR检测土壤中小麦矮腥黑粉菌的方法,包括:(1)将取回的土壤样品过网筛除去杂质,然后冷冻过夜;(2)采用FastDNATM SPIN Kit for Soil试剂盒提取土壤样品的总DNA;(3)以待测土壤样品的总DNA以及梯度稀释的阳性对照模板同时进行QPCR反应,得到土壤样品及阳性对照的扩增曲线和Ct值;(4)根据梯度稀释的阳性对照模板的扩增曲线和Ct值以及待测土壤样品的扩增曲线和Ct值,判断土壤样品中是否含有小麦矮腥黑粉菌。该方法通过冷冻处理土壤样品,改良DNA提取方法,能提取质量较好的DNA,解决了从土壤中难以提取DNA的困难,实现了土壤中小麦矮腥黑粉菌的检测。