筛选基因编辑产物的方法
- 专利权人:
- 中国水稻研究所
- 发明人:
- 王克剑,华宇峰,王春
- 申请号：
- CN201610695151.2
- 公开号：
- CN106319045A
- 申请日:
- 2016.08.19
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 金祺
- 摘要：
- 本发明公开了一种ACT‑PCR筛选基因编辑产物的方法，包括如下步骤：1)、提取野生型及待测样品的基因组DNA；2)、设计引物：使正向引物FA的3’末端跨过基因编辑拟切割位点；反向引物RA是以目标基因的基因组序列为参照，位于互补链的下游，反向引物RA的Tm值不低于正向引物FA；3)、获得最大临界退火温度Tam和最小临界退火温度Tlm；4)、利用引物对FA/RA以基因组DNA为模板、设定退火温为Tlm<Tm≤Tam之间，进行PCR扩增；5)、将扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分离；能够扩增出目的条带所对应的样品为野生型或者杂合突变体；不能扩增出目的条带所对应的样品为纯合突变体。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
