In the present specification, a method for producing functional keratinocyte stem cells directly differentiated from human ESC / iPSC in a cell culture system having no chemically defined serum, and cells derived from these functional keratinocyte stem cells and use thereof Provide a method. A method for culturing primary keratinocytes is also provided.本明細書では、組成が化学的に規定された血清を含まない細胞培養系においてヒトESC/iPSCから直接分化された機能性ケラチノサイト幹細胞の生成方法ならびに、それら機能性ケラチノサイト幹細胞由来の細胞およびその使用方法を提供する。また、初代ケラチノサイトの培養方法も提供する。