The present invention is a method for producing a sperm stem cell-like cell in vitro from an isolated pluripotent stem cell-derived primordial germ cell-like cell, comprising the steps of: Co-culturing in culture to obtain a reconstituted testis, and (2) culturing the reconstituted testis obtained by gas-liquid interface culture to induce DDX4-positive and PLZF-positive cells in the reconstituted testis And a method； and a method for producing a germ line stem cell-like cell, comprising dissociating a sperm stem cell-like cell obtained by the method from a reconstituted testis, and culturing the sperm stem cell under conditions capable of inducing a germ line stem cell. provide.本発明は、単離された多能性幹細胞由来の始原生殖細胞様細胞からインビトロで精子幹細胞様の細胞を製造する方法であって、(1) 始原生殖細胞様細胞を生殖巣体細胞と浮遊培養にて共培養し、再構成精巣を得る工程、及び(2) 得られた再構成精巣を気液界面培養して、該再構成精巣中でDDX4陽性かつPLZF陽性細胞を誘導する工程を含む、方法；及び 当該方法により得られる精子幹細胞様の細胞を再構成精巣から解離し、精子幹細胞から生殖系列幹細胞を誘導し得る条件下で培養することを含む、生殖系列幹細胞様細胞の製造方法を提供する。
