The present invention relates to the production of cholesterol in organisms of the Fungi kingdom. More particularly, the invention relates to genetically modified Fungi that autonomously produce cholesterol from a single carbon source. The invention also relates to the use of Fungus according to the invention for the production of unlabeled and labeled cholesterol.La présente invention concerne la production de cholestérol chez desorganismes du règne des Fungi. Plus particulièrement, l'invention concerne desFungus génétiquement modifiés produisant de manière autonome du cholestérol àpartir d'une source de carbone simple. L'invention concerne égalementl'utilisation de Fungus selon l'invention pour la production de cholestérolnon-marqué et marqué.