To provide a novel and efficient method for estimation of free polysaccharides in multivalent polysaccharide protein conjugate vaccines, wherein anti-carrier protein antibody coupled beads are mixed with sample containing multivalent protein polysaccharide conjugates to enable the separation of conjugated and unconjugated polysaccharide followed by estimation of free polysaccharide content from supernatant by multiplex competitive inhibition assay. The instant method overcomes the limitations of HPSEC & Deoxycholate based methods for free polysaccharide estimation in multivalent polysaccharide protein conjugate vaccines. Additionally total polysaccharide content and percent adsorption of polysaccharides can also be measured by instant method.La présente invention concerne un nouveau procédé efficace destimation de polysaccharides libres dans des vaccins polysaccharidiques multivalents associés à des protéines, des billes couplées à des anticorps anti-protéines porteuses étant mélangées à un échantillon contenant des conjugués polysaccharidiques multivalents associés à des protéines pour permettre de séparer les polysaccharides conjugués et ceux non-conjugués et destimer ensuite la teneur en polysaccharides libres dans le surnageant en utilisant un dosage par inhibition compétitive multiplex. Le procédé de linvention surmonte les limitations des procédés de HPSEC et ceux basés sur le désoxycholate dans lestimation des polysaccharides libres présents dans les vaccins polysaccharidiques multivalents associés à des protéines. De plus, la teneur totale en polysaccharides et le pourcentage dadsorption de polysaccharides peuvent également être mesurés par le procédé de linvention.
