一种基因敲除减毒单核细胞增生李斯特氏菌及其制备方法

• 收藏
• 分享

专利权人:

上海理工大学

发明人:

谢曼曼,刘箐,孙静娟,马俊飞,马兰

申请号：

CN201710179593.6

公开号：

CN107058202A

申请日:

2017.03.23

申请国别(地区):

CN

年份:

2017

代理人:

摘要：

一种基因敲除减毒单核细胞增生李斯特氏菌，缺失hly基因，其保藏编号为：CCTCC M 2016523。还提供了上述减毒单核细胞增生李斯特氏菌的制备方法，以EGD‑e基因组为模板扩增hly基因的上游片段P1/P2、下游片段P3/P4；然后进行单酶切，产物使用连接酶连接，得到的上下游连接产物与pMD19‑T Vector连接；将连有同源臂的pMD19‑T Vector与pKSV7质粒使用限制性内切酶SmaI和SalI进行双酶切，产物使用连接酶连接，将阳性克隆的质粒抽提后进行SmaI和SalI限制性内切酶双酶切，获得hly基因缺失的Lm减毒菌株。通过实验证明，hly基因敲除后，Lm的毒性下降。

来源网站：

中国工程科技知识中心

来源网址：

http://www.ckcest.cn/home/