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CRISPR/Cas9构建notch1a突变体斑马鱼的方法
- 专利权人:
- 上海海洋大学
- 发明人:
- 张庆华,季策,董雪红,张秋月,岳倩文,李伟明
- 申请号：
- CN201810527941.9
- 公开号：
- CN108823249A
- 申请日:
- 2018.05.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 曹莉
- 摘要：
- 本发明公开了涉及一种CRISPR/Cas9构建notch1a突变体斑马鱼的方法；包括如下步骤：确定notch1a基因敲除的靶点位置；以pUC19‑gRNA scaffold质粒为模板，使用引物T7‑notch1a‑sfd、tracr rev进行PCR扩增；PCR产物纯化、体外转录获得gRNA；将gRNA与Cas9mRNA导入斑马鱼胚胎中，培养获得稳定遗传的notch1a突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术，通过选择一段独特的打靶区，使得斑马鱼中的notch1a被敲除，又不“误伤”其他基因，形成notch1a基因敲除的斑马鱼；另外，本发明还公开了notch1a基因缺失斑马鱼突变体的表型，对于研究Notch信号通路中Notch1a受体的作用意义重大。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
