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文蛤基因组DNA的提取方法
- 专利权人:
- 焦秀花
- 发明人:
- 焦秀花
- 申请号：
- CN201510956386.8
- 公开号：
- CN106893716A
- 申请日:
- 2015.12.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及一种文蛤基因组DNA的提取方法，步骤如下：（1）取文蛤肌肉组织粉碎后加入到含500μL STE及50μL 10% SDS裂解缓冲液的离心管中，并加入5μL 浓度为20mg/mL的蛋白酶K，55-57℃水浴10-60 min；（2）加入250μL饱和酚、250μL氯仿/异戊醇（24:1），轻柔晃动5-15min，室温10000-12000 rpm离心8-15min；（3）吸取上清液至新离心管中，重复步骤（2）；（4）吸取上清液至新离心管中，加入500μL氯仿/异戊醇，轻柔晃动5-15min，室温10000-12000 rpm离心8-15min；（5）吸取上清液，加入50μL 3M NaAc，添加1mL在-20℃预冷的无水乙醇，-20℃放置20-50min，10000-15000rpm离心8-15min，得到DNA沉淀；（6）70%乙醇洗涤沉淀1-3次；（7）沉淀干燥溶解去RNA；本发明的方法特别适于文蛤DNA的提取，提取的DNA浓度、纯度非常高，适于文库构建、PCR等后续研究。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
