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皱纹盘鲍基因组DNA的提取方法
- 专利权人:
- 焦秀花
- 发明人:
- 焦秀花
- 申请号:
- CN201510956358.6
- 公开号:
- CN106893712A
- 申请日:
- 2015.12.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及皱纹盘鲍基因组DNA的提取方法,步骤如下:(1)取皱纹盘鲍肌肉组织粉碎后加入到含500μL STE及50μL 10% SDS裂解缓冲液的离心管中,并加入5μL浓度为20mg/mL的蛋白酶K,55-57℃水浴10-60min;(2)加入250μL饱和酚、250μL氯仿/异戊醇(24:1),轻柔晃动5-15min,室温10000-12000rpm离心8-15min;(3)吸取上清液至新离心管中,重复步骤(2);(4)吸取上清液至新离心管中,加入500μL氯仿/异戊醇,轻柔晃动5-15min,室温10000-12000rpm离心8-15min;(5)吸取上清液,加入50μL 3M NaAc,添加1mL在-20℃预冷的无水乙醇,-20℃放置20-50min,10000-15000rpm离心8-15min,得到DNA沉淀;(6)70%乙醇洗涤沉淀1-3次;(7)沉淀干燥溶解去RNA;本发明的方法特别适于皱纹盘鲍DNA的提取,提取的DNA浓度、纯度非常高,适于文库构建、PCR等后续研究。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/