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奶牛乳房炎致病菌三联表位基因与石斑鱼c型溶菌酶基因重组腺病毒的构建方法和应用
- 专利权人:
- 天津农学院
- 发明人:
- 金天明,林静,李小慧,高珂珂,尚翠玲,孟佳丽,李昕,赵瑞利
- 申请号：
- CN201710908690.4
- 公开号：
- CN107488676A
- 申请日:
- 2017.09.29
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 崔继民
- 摘要：
- 本发明公开了一种奶牛乳房炎致病菌三联表位基因与石斑鱼c型溶菌酶基因重组腺病毒的构建方法和应用。试验中选取奶牛乳房炎主要致病菌特异性蛋白，通过ABCpred方案与BepiPred方案预测获得每种蛋白的2个B细胞优势表位将所得优势表位进行连接获得TRE序列，GeneBank上得到cLYZ序列并进行哺乳动物细胞偏好性密码子优化。在TRE序列与cLYZ序列之间插入高剪切效率的Thoseaasigna virus 2A(T2A)自剪切肽，合成后得到含有目的基因片段的pMD‑19T载体。将TRE基因、T2A基因、cLYZ基因亚克隆到穿梭载体pDC315‑MCS‑EGFP上；利用LipoFiterTM脂质体转染法将重组穿梭载体与腺病毒大骨架pBHGlox(delta)E1,3cre共转染HEK293细胞，实现同源重组，获得重组腺病毒Ad‑TRE‑T2A‑cLYZ‑EGFP。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
