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共表达SAL‑2和hLYZ双抑菌基因重组腺病毒的构建方法及重组腺病毒和应用
- 专利权人:
- 天津农学院
- 发明人:
- 金天明,李萌,龙雨清,张东超,弓建芳,高珂珂,李小慧,林静
- 申请号：
- CN201510574849.4
- 公开号：
- CN105132461B
- 申请日:
- 2015.09.10
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 谢宇强
- 摘要：
- 本发明公开了一种共表达SAL‑2基因和hLYZ双抑菌基因重组腺病毒载体的构建方法及重组腺病毒和应用，采用从金黄色葡萄球菌噬菌体基因组和人乳体细胞总RNA中分别扩增出的SAL‑2基因和hLYZ基因，将获得的目的基因克隆到pShuttle‑IRES‑hrGFP‑2穿梭载体中，线性化重组穿梭载体后与骨架载体pAdeasy‑1共转染大肠杆菌BJ5183感受态细胞，使其在BJ5183内进行同源重组，构建了包含上述目的基因的重组腺病毒质粒Ad‑SAL‑LYZ；将重组腺病毒质粒由PacⅠ酶切后，经脂质体介导转染HEK293细胞，包装获得高滴度的重组腺病毒；评价SAL‑2基因和hLYZ基因在腺病毒介导下对奶牛乳房炎主要致病菌的联合抑制作用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
