The present invention relates to the fields of immunotherapy, molecular biology and recombinant nucleic acid technology. In particular, the present invention provides a TALEN comprising in its genome at least 5 ′ to 3 ′ direction a modified human T cell receptor alpha gene having an insertion comprising a self-cleaving peptide, a polynucleotide encoding a chimeric antigen receptor. With respect to modified human primary cells, the cells have an undetectable cell surface expression of endogenous alpha beta T cell receptor compared to TCR positive control cells and express a receptor that targets pathological cells And also relates to the use of the cells to treat diseases including cancer. The invention further relates to a method for producing such TALEN-modified cells and other genetic modifications obtained using such engineered human primary cells or alternative and / or additional rare-cutting endonucleases. It relates to means for detecting human primary cells.本発明は、免疫療法、分子生物学および組み換え核酸技術の分野に関する。特に、本発明は、少なくとも、5'から3'方向に、自己切断ペプチド、キメラ抗原受容体をコードするポリヌクレオチドを含む挿入を有する改変ヒトT細胞受容体アルファ遺伝子をそのゲノム中に含む、TALEN改変ヒト初代細胞に関し、該細胞は、TCR陽性対照細胞と比較して内因性アルファベータT細胞受容体の検出不能な細胞表面発現を有し、かつ病理学的細胞を標的とする受容体を発現し、がんを含む疾患を処置するための該細胞の使用にも関する。本発明はさらに、そのようなTALEN改変細胞を産生するための方法に関し、かつそのような操作されたヒト初代細胞または代替のおよび/もしくは追加のレアカットエンドヌクレアーゼを用いて得られる他の遺伝子改変ヒト初代細胞を検出するための手段に関する。
