本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种水稻高效转化载体pCXUN‑Cas9‑sgRNA及其构建方法。本发明利用CRISPR/CAS9技术高效转化水稻敲除相关基因得到一种载体，该载体被命名为pCXUN‑CAS9‑sgRNA。所述的载体包含有如序列表SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。本发明利用sgRNA方法突变水稻靶基因得到高效转化载体，是一种一元载体，本发明的重组载体可用于定向突变水稻靶基因，研究水稻中相关基因的功能和作用，也可以用于构建相应的基因突变体和大片段缺失。本发明的载体具有很高的转化效率和打靶突变效率，可以在水稻中稳定遗传及应用。
