本发明公开了一种表达小鹅瘟病毒VP2的重组鸭瘟病毒及其构建方法和应用，该重组鸭瘟病毒的基因组中插入有小鹅瘟病毒VP2基因，所述小鹅瘟病毒VP2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述构建方法包括：(1)将pDEV-vac中gfp基因的CMV启动子替换成EF1启动子，获得pDEV-EF1；(2)将Pcmv-VP2-BGH-pA表达框插入pDEV-EF1，获得pDEV-VP2；(3)将pDEV-VP2转染鸡胚成纤维细胞，拯救获得所述重组鸭瘟病毒。所述重组鸭瘟病毒与亲本毒株相比，其病毒蚀斑大小不具有显著差异，说明小鹅瘟病毒VP2基因的插入不影响鸭瘟病毒在鸡胚成纤维细胞上的增殖特性。所述重组鸭瘟病毒感染鸡胚成纤维细胞后成功表达小鹅瘟病毒VP2。所述重组病毒使番鸭成功免疫产生相应抗体，为鸭瘟病毒-小鹅瘟病毒二联疫苗的研制奠定了基础。
