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一种应用CRISPR/Cas9介导ES打靶技术制备基因打靶动物模型的方法
- 专利权人:
- 江苏集萃药康生物科技有限公司
- 发明人:
- 琚存祥,赵静,张明坤,吴丹,侯欢欢,高翔
- 申请号:
- CN201811535721.7
- 公开号:
- CN111321171A
- 申请日:
- 2018.14.12
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明公开了一种应用CRISPR/Cas9系统基因打靶的方法,通过选择具有DNA单链切割能力的Cas9的突变体,针对每个打靶位点使用一条tracrRNA/crRNA二元复合体或者一条sgRNA,Cas9的突变体识别打靶位点附近的保守的间隔相邻基序,产生DNA单链切口,而不产生DNA双链断裂,诱导单链切口同源重组修复。本发明还提供了利用所述方法介导ES打靶技术制备基因打靶动物模型的方法。本发明降低了基因打靶过程中HMEJ修复带来的插入缺失突变,获得高效打靶阳性克隆。本发明可作为平台技术广泛用于基因打靶动物模型的制备。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/