PROBLEM TO BE SOLVED: To provide N,N,N-trialkylchitosan, methods of preparation thereof, and their uses in pharmaceutical, neutraceutical and cosmeceutical fields.SOLUTION: A method for preparing N,N,N-trimethylchitosan comprises: providing chitosan； b) methylating the chitosan by the reductive amination reaction using formaldehyde and formic acid to generate N,N-dimethylchitosan； and c) methylating the N,N-dimethylchitosan to generate N,N,N-trimethylchitosan, in a reactional solvent chosen from water and water mixed with water-miscible solvent, using a methylating agent and a base chosen from a hydroxide salt or an alkali carbonate or bicarbonate. When the generated N,N,N-trimethylchitosan is measured byH-NMR spectroscopy in a protonated form, it has 50% or more of the degree of quaternization and has 40% or less of O-substitution.SELECTED DRAWING: Figure 2【課題】Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリアルキルキトサン、その調製方法およびそれの薬学的、栄養医薬的および美容医薬的分野における使用方の提供。【解決手段】Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルキトサンの調製方法であって、ａ）キトサンを提供することと、ｂ）ホルムアルデヒドおよび蟻酸を用いた還元的アミノ化反応によりキトサンをメチル化してＮ，Ｎ－ジメチルキトサンを生成することと、ｃ）水または水混和性溶媒と混合した水から選択される反応溶媒中で、メチル化剤と水酸化物塩またはアルカリ性の炭酸塩もしくは重炭酸塩から選択される塩基とを用いて、Ｎ，Ｎ－ジメチルキトサンをメチル化してＮ，Ｎ，Ｎ－トリメチルキトサンを生成すること、を含み、生成したＮ，Ｎ，Ｎ－トリメチルキトサンが、１Ｈ－ＮＭＲ分光法によってプロトン化形態で測定された場合に５０％以上の第四級化度を有し、且つ、４０％以下のＯ－置換度を有する方法。【選択図】図２
