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抑制甲型流感病毒复制的shRNA序列及其应用
- 专利权人:
- 中国人民解放军沈阳军区总医院
- 发明人:
- 马壮,孙文武,史亮,王忠华,曹建平
- 申请号：
- CN201710651645.5
- 公开号：
- CN107586778A
- 申请日:
- 2017.08.02
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明提供了一段shRNA序列:GCTGGTCTGACTCACATAATG,将该序列退火后,插入siRNA表达质粒,转化大肠杆菌。经过克隆PCR筛选阳性克隆,保留菌种。扩增基因工程菌,提取纯化质粒。将该质粒转染MDCK细胞。然后以流感病毒感染该细胞,48小时后,收集细胞培养上清,提取总RNA,以RT‑PCT方法检测培养上清中的流感病毒含量。以该质粒与PEI复合物形式给予BALB/C小鼠雾化吸入,连续3天,每天30分钟。然后以流感病毒攻击该小鼠,3天后处死小鼠。取出肺脏制成组织匀浆,从组织匀浆中提取总RNA以RT‑PCT方法检测培养上清中的流感病毒含量。根据不同组流感病毒的含量可以确定该shRNA具有抑制流感病毒复制的作用。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
