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通过荧光时实定量PCR建立转基因小麦生长期内根际土壤中镰刀菌拷贝数的方法
- 专利权人:
- 江苏省农业科学院
- 发明人:
- 史建荣,王秀宇,林凡云,祭芳,董飞,曹欢
- 申请号:
- CN201110419678.X
- 公开号:
- CN102517385A
- 申请日:
- 2011.12.15
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 孙忠浩
- 摘要:
- 本发明涉及一种通过时实荧光定量PCR建立转基因小麦生长期内根际土壤中镰刀菌(Fusarium.sp)拷贝数的方法,是在田间建立对角线5点采样取土点并标记定位,在播种前和生育期分别在上述各采样取土点采集根际土壤样本;将各采样取土点采集的土壤样本提取总DNA,并将样本的总DNA溶于ddH2O中,以镰刀菌特异性通用引物对SEQIDNo.2和SEQIDNo.3对每个时期的样本DNA进行PCR扩增,获得大小在418bp的特异性片段;由荧光定量PCR仪根据荧光信号的变化及标准曲线直接测出相应的镰刀菌拷贝数;将不同时期土壤样本中镰刀菌拷贝数汇总,形成转基因小麦生长期内根系土壤中镰刀菌拷贝数。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/