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含SOD基因的重组双表达家蚕多角体杆状病毒的构建方法
- 专利权人:
- 浙江大学
- 发明人:
- 缪云根,岳万福
- 申请号:
- CN200710164492.8
- 公开号:
- CN101182549A
- 申请日:
- 2007.12.05
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2008
- 代理人:
- 冯子玲
- 摘要:
- 含SOD基因的重组双表达家蚕多角体杆状病毒的构建方法,包括提取家蚕总RNA,设计MnSOD引物,合成单链cDNA,合成MnSOD基因,将MnSOD基因与pFastBacHTa连接并转化XL-Blue细胞,提取重组供体质粒pFastBacHTa/MnSOD;以家蚕杆状病毒DNA为模板,合成家蚕多角体基因,并将其克隆到pFastBac Dual plasmid质粒;将MnSOD基因插入双表达质粒的P10启动子下构建成双表达载体:Bm polyhedrin pFB dual/MnSOD;将其转染后提取含有MnSOD基因和多角体基因的双表达病毒DNA;在转染试剂脂质体介导下导入转染家蚕培养细胞,获得重组病毒。提供可以添食感染家蚕幼虫的病毒粒子,通过家蚕表达目的基因MnSOD,实现规模化和工业化生产。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/