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一种基于CRISPR-Cas9技术靶向敲除猪GDPD2基因的细胞系及其构建方法
- 专利权人:
- 扬州大学
- 发明人:
- 王海飞,吴圣龙,包文斌,周雅静,范海瑞
- 申请号：
- CN202010867825.9
- 公开号：
- CN112011539A
- 申请日:
- 2020.08.26
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9技术靶向敲除猪GDPD2基因的细胞系及其构建方法，该细胞系采用以下步骤制备：(1)根据猪GDPD2基因设计sgRNA向导序列；(2)将正链sgRNA序列和负链sgRNA序列退火形成双链DNA；将双链DNA与线性化的pGK1.1载体连接获得阳性打靶载体；(3)将阳性打靶载体混合电转染靶细胞IPEC‑J2获得GDPD2基因敲除的IPEC‑J2细胞。本发明首次利用CRISPR/Cas9技术建立猪GDPD2基因敲除的IPEC‑J2细胞系，有助于研究GDPD2的蛋白功能。CRISPR/Cas9敲除技术方法简单，设计sgRNA即可对靶基因进行高效敲除，导致GDPD2基因功能的缺失，是理想的GDPD2基因敲除的IPEC‑J2细胞模型。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
