A single-chain insulin analogue comprises a B-chain insulin polypeptide connected to an A-chain insulin polypeptide by a C-domain polypeptide. The B-chain insulin polypeptide contains a Cysteine substitution at position B4. The A-chain insulin polypeptide contains a Cysteine substitution at position A10. The C-domain polypeptide is 4 to 11 amino acids long. The analogue mitigates the unfavorable activity of this 4th disulfide bridge in conventional two-chain insulin analogues resulting in a duration of insulin signaling similar to that of wild-type insulin. A method of treating a patient with diabetes mellitus comprises the administration of a physiologically effective amount of the protein or a physiologically acceptable salt thereof to a patient. Use of a single-chain insulin analogue of the present invention in an insulin delivery device (such as a pump or pen) or as part of a high-temperature polymer-melt manufacturing process.L'invention concerne un analogue d'insuline à chaîne unique comprenant un polypeptide d'insuline à chaîne B relié à un polypeptide d'insuline à chaîne A par un polypeptide à domaine C. Le polypeptide d'insuline à chaîne B contient une substitution de cystéine en position B4. Le polypeptide d'insuline à chaîne A contient une substitution de cystéine en position A10. Le polypeptide de domaine C présente une longueur de 4 à 11 acides aminés. L'analogue atténue l'activité défavorable de ce 4ème pont disulfure dans les analogues d'insuline à deux chaînes classiques conduisant à une durée de signalisation d'insuline similaire à celle de l'insuline de type sauvage. L'invention concerne un procédé de traitement d'un patient souffrant de diabète sucré qui comprend l'administration d'une quantité physiologiquement efficace de la protéine ou d'un sel physiologiquement acceptable correspondant au patient. L'invention concerne également l'utilisation d'un analogue d'insuline à chaîne unique de la présente invention dans un dispositif d'administration d
