A method for reducing or eliminating the cooling lesion during the cryopreservation by vitrification of living systems, wherein said method comprises: adding to a living system a preservation means comprising a vehicle solution and one or more cryoprotectants in a concentration sufficient for induce vitrification by refrigeration； and cooling the living system to a temperature below about 0 ° C； characterized in that the preservation medium comprises non-penetrating polymers in concentrations that increase the tonicity of the preservation medium to 1.2 to 1.7 times isotonic to reduce or eliminate the injury by cooling.Un método para reducir o eliminar la lesión por enfriamiento durante la crioconservación por vitrificación de sistemas vivos, en que dicho método comprende: añadir a un sistema vivo un medio de preservación que comprende una solución de vehículo y uno o más crioprotectores en una concentración suficiente para inducir la vitrificación por refrigeración； y enfriar el sistema vivo a una temperatura por debajo de aproximadamente 0ºC； caracterizado porque el medio de preservación comprende polímeros no penetrantes en concentraciones que aumentan la tonicidad del medio de conservación a 1.2 a 1.7 veces isotónico para reducir o eliminar la lesión por enfriamiento.
