Board Of Regents Of the University Of Texas System;Amprion Inc.;Jara, Claudio Soto;Shahnawaz, Mohammad;Lebovitz, Russell M.;Vollrath, Benedikt K.
发明人:
申请号:
EP15839278.7
公开号:
EP3191599A1
申请日:
2015.09.11
申请国别(地区):
EP
年份:
2017
代理人:
摘要:
Methods and kits are provided for amplifying and detecting misfolded proteins from samples, for example, from patients having Alzheimer's Disease, Parkinson's Disease, and the like. For example, a method for determining a presence of soluble, misfolded protein in a sample may include contacting the sample with a monomeric, folded protein to form an incubation mixture; conducting an incubation cycle two or more times effective to form an amplified portion of misfolded protein; incubating the incubation mixture effective to cause misfolding and/or aggregation of at least a portion of the monomeric, folded protein; physically disrupting the incubation mixture effective to break up at least a portion of any protein aggregate present; and determining the presence of the soluble, misfolded protein in the sample by detecting at least a portion of the soluble, misfolded protein. The monomeric, folded protein and the soluble, misfolded protein may exclude prion protein (PrP) and isoforms thereof.L'invention concerne des méthodes et des kits permettant d'amplifier et de détecter des protéines mal-repliées à partir d'échantillons, par exemple, de patients atteints de la maladie d'Alzheimer, de la maladie de Parkinson, et analogues. Par exemple, une méthode permettant de déterminer la présence d'une protéine soluble mal-repliée dans un échantillon peut consister à mettre en contact l'échantillon avec une protéine monomère repliée afin de former un mélange d'incubation; à effectuer un cycle d'incubation au moins deux fois, ledit cycle étant efficace pour former une partie amplifiée de la protéine mal-repliée; à incuber le mélange d'incubation, ladite incubation étant efficace pour provoquer un mauvais repliement et/ou l'agrégation d'au moins une partie de la protéine repliée monomère; à perturber physiquement le mélange d'incubation, ladite perturbation étant efficace pour casser au moins une partie d'un agrégat protéique quelconque présent; et à déterminer la présence de la pro