VOGELSTEIN, Bert,KINZLER, Kenneth W.,ZHOU, Shibin,DIAZ, Luis,PAPADOPOULOS, Nickolas,SKORA, Andrew,DOUGLASS, Jackie,HWANG, Michael S.
申请号：
USUS2016/023673
公开号：
WO2016/154246A1
申请日:
2016.03.23
申请国别(地区):
US
年份:
2016
代理人:
摘要：
Mutant epitopes encoded by cancer genes are virtually always located in the interior of cells, making them invisible to conventional antibodies. We generated single chain variable fragments (scFvs) specific for mutant peptides presented on the cell surface by human leukocyte antigen (HLA) molecules. These scFvs can be converted to full-length antibodies, termed MANAbodies, targeting "Mutation Associated Neo-Antigens" bound to HLA. A phage display library representing a highly diverse array of single-chain variable fragment sequences was first designed and constructed. A competitive selection protocol was then used to identify clones specific for peptides bound to pre-defined HLA types. In this way, we obtained scFvs, including one specific for a peptide encoded by a common KRAS mutant and another by a common EGFR mutant. Molecules targeting MANA can be developed that specifically react with mutant peptide-HLA complexes even when these peptides differ by only one amino acid from the normal, wild-type form.L'invention concerne des épitopes mutants encodés par des gènes du cancer qui sont pratiquement toujours situés à l'intérieur des cellules, ce qui les rend invisibles aux anticorps classiques. Nous avons produit des fragments variables à chaîne unique (scFv) spécifiques de peptides mutants présentés à la surface des cellules par des molécules d'antigènes de leucocytes humains (HLA). Ces scFv peuvent être convertis en anticorps pleine longueur, dénommés MANAcorps, qui ciblent les « néo-antigènes associés à la mutation » liés aux HLA. Une banque d'affichage de phages représentant un très grande diversité de séquences de fragments variables à chaîne unique a d'abord été conçue et construite. Un protocole de sélection compétitive a ensuite été utilisé pour identifier des clones spécifiques de peptides liés à des types prédéfinis de HLA. Ainsi, nous avons obtenu des scFv, comprenant un scFv spécifique d'un peptide encodé par un gène KRAS mutant courant et un autre par un
