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一种不含基因组DNA的总RNA制备方法
- 专利权人:
- 安徽师范大学
- 发明人:
- 朱国萍,徐蕾,王鹏,曹正宇,靳明明,徐雷雷,王文才,李雪
- 申请号:
- CN201110146842.4
- 公开号:
- CN102250877B
- 申请日:
- 2011.06.02
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 方南
- 摘要:
- 本发明公开了一种不含基因组DNA的总RNA制备方法,本发明采用十二烷基硫酸钠作为裂解试剂,裂解细胞后使用醋酸钾和十二烷基硫酸钠反应生成十二烷基硫酸钾(PDS)沉淀,同时共沉淀蛋白质以及大部分基因组DNA,由于在酸性醋酸钾溶液、硫氰酸胍存在时核酸可与硅胶柱吸附,并且吸附的核酸可按分子量大小利用一定浓度醋酸钾解离的性质,利用硅胶柱分离总RNA和残留的基因组DNA。最后采用乙醇沉淀得到总RNA样品。其优点在于通过控制醋酸钾浓度,可使结合能力较差的小分子量的RNA和其他种类的RNA均进入穿过液,从而能得到较好的总RNA产率;同时使基因组DNA被硅胶膜吸附,以分离RNA和基因组DNA。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/