不含基因组DNA的总RNA制备方法
- 专利权人:
- 安徽师范大学
- 发明人:
- 朱国萍,徐蕾,凌烈锋,王鹏,曹正宇,宋平,吕俊,靳明明,徐雷雷,裴云云
- 申请号:
- CN201110146840.5
- 公开号:
- CN102286459B
- 申请日:
- 2011.06.02
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 方南
- 摘要:
- 本发明公开了不含基因组DNA的总RNA制备方法,采用十二烷基硫酸钠作为裂解试剂,裂解细胞后使用醋酸钾和十二烷基硫酸钠反应生成十二烷基硫酸钾(PDS)沉淀,同时共沉淀蛋白质以及大部分基因组DNA。然后利用在硫氰酸胍存在时核酸可被酚抽提液吸附,并且吸附的核酸可按分子量大小利用一定浓度醋酸钾解离的性质,在核酸中加入一定浓度的硫氰酸胍和酸性醋酸钾,采用酚抽提分离总RNA和残留的基因组DNA。最后采用乙醇沉淀得到总RNA样品。本法利与现有技术相比,所得RNA样品残留基因组DNA最少,每微克103拷贝(约4皮克)。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心