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不含基因组DNA的总RNA制备方法
专利权人:
安徽师范大学
发明人:
朱国萍,徐蕾,凌烈锋,王鹏,曹正宇,宋平,吕俊,靳明明,徐雷雷,裴云云
申请号:
CN201110146840.5
公开号:
CN102286459B
申请日:
2011.06.02
申请国别(地区):
中国
年份:
2012
代理人:
方南
摘要:
本发明公开了不含基因组DNA的总RNA制备方法,采用十二烷基硫酸钠作为裂解试剂,裂解细胞后使用醋酸钾和十二烷基硫酸钠反应生成十二烷基硫酸钾(PDS)沉淀,同时共沉淀蛋白质以及大部分基因组DNA。然后利用在硫氰酸胍存在时核酸可被酚抽提液吸附,并且吸附的核酸可按分子量大小利用一定浓度醋酸钾解离的性质,在核酸中加入一定浓度的硫氰酸胍和酸性醋酸钾,采用酚抽提分离总RNA和残留的基因组DNA。最后采用乙醇沉淀得到总RNA样品。本法利与现有技术相比,所得RNA样品残留基因组DNA最少,每微克103拷贝(约4皮克)。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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