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一种血管生长抑制因子Kringle 5融合和非融合基因的克隆、鉴定和表达方法
- 专利权人:
- 陕西北美基因股份有限公司
- 发明人:
- 边六交,杨晓燕,冯萱,陈超
- 申请号：
- CN200810150873.5
- 公开号：
- CN101671675A
- 申请日:
- 2008.09.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2010
- 代理人:
- 徐 平
- 摘要：
- 本发明涉及一种血管生长抑制因子Kringle 5融合和非融合基因的克隆、鉴定和表达方法。包括以下步骤：1.ThioA/L15/7和E.coli PET32(载体)质粒DNA的制备；2.目的基因Kringle5的PCR；3.PCR产物的抽提纯化；4.双酶切PCR产物以及载体质粒DNA；5.DNA凝胶回收；6.制备重组载体pET32/kringle5；7.感受态细胞的制备；8.感受态细胞的转化；9.小型发酵及重组蛋白的诱导表达；10.培养并提取质粒，双酶切后进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。成功构建pET28a(+)-K5基因的非融合表达载体。为K5基因在大肠杆菌中的非融合表达的研究奠定了基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
