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利用高效液相色谱法检测玉米细胞核DNA和线粒体DNA甲基化水平的方法
- 专利权人:
- 四川农业大学
- 发明人:
- 曹墨菊,荣廷昭,张晨,张艳花,汪静,卢艳丽,刘和洋,汪瀚宇,王继玥,曾文兵,汪生庆,刘坚,高世斌,周树峰,胡尔良
- 申请号:
- CN201210519564.7
- 公开号:
- CN102944638A
- 申请日:
- 2012.12.06
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 龚燮英
- 摘要:
- 本发明公开了一种利用高效液相色谱法检测玉米细胞核DNA和线粒体DNA甲基化水平的方法,可供处理100份1μgDNA的水解混合液配制方法为:将250U Benzonase、300mU磷酸二酯酶I、200U碱性磷酸酶加入至5mL pH为7.9的Tris-HCl水解缓冲液内;流动相的pH:对于线粒体DNA,用磷酸调节pH至3.42;对于细胞核DNA,用磷酸调节pH至3.0;色谱条件为:色谱柱:C18填料色谱柱;流速:0.8mL/min,检测器波长:287nm;柱温:35℃;进样量:20μL;流动相:甲醇:5mM戊烷磺酸钠:三乙胺(10:90:0.2,V/V),并用磷酸调节pH分别至3.42和3.0。方法简单易行,20min内可将各组分完全分离。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/