本发明公开了人白细胞介素2‑聚乙二醇偶联物及其制备方法与应用。本发明公开一种人白细胞介素2‑聚乙二醇偶联物,其包含含有至少一个非天然氨基酸的重组人白细胞介素2和偶联在所述至少一个非天然氨基酸上的PEG,所述至少一个非天然氨基酸的位置选自对应于SEQ ID NO:2的L36、M39、L40、M46、P47、L63、L66、E67、L70和A73中的一个或多个位点,所述重组人白细胞介素2为SEQ ID NO:3所示的蛋白或其功能活性片段。本发明提供的人白细胞介素2‑聚乙二醇偶联物可以单药或者与抗肿瘤药物联用,用于实体瘤或血液肿瘤的治疗。