本发明公开了一种人肝再生增强因子突变体、基因及应用。人肝再生增强因子突变体,氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明人肝再生增强因子突变体通过将N端7个氨基酸残基删除,然后再进行了4个单点突变(C15S、K71R、R72K、C124S)获得一种新的突变体,该突变体的基因在毕赤酵母中表达获得的突变体蛋白为单体形式存在,更有利于活性中心(C62‑C65)和结合在附近的FAD的暴露,实验结果表明其巯基氧化活性提高了20%以上,体外促肝细胞增殖能力和体内四氯化碳肝损伤的保护效果也有所提高,且潜在酶切位点突变掉后,所得产物更加均一,为后续的提取纯化的规模化可操作性提供保障,为开发临床应用提供了可靠基础。